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提取剂的选择及样品的预处理 | |||
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值得注意的是,当有另一种脂类存在时,还会影响到某种脂类的溶解度。例如卵磷脂与丝氨酸磷脂共存时,丝氨酸磷脂可在乙醇中部分溶解。氯仿通常是一种有用的脂肪溶剂,可是若有糖脂或蛋白质存在,则氯仿在提取、定量这类结合脂肪的效果并不能令人满意。
天然的脂肪并不是单纯的甘油三酯,而是各种甘油三酯的混合物,它们在不同溶剂中的溶解度因多种因素而变化,这些因素有脂肪酸的不饱和性、脂肪酸的碳链长度、脂肪酸的结构以及甘油三酸酯的分子构型等。显然,不同来源的食品,由于它们结构上的差异,不可能企图采用一种通用的提取剂。脂类不溶于水,易溶于有机溶剂。测定脂类大多采用低沸点的有机溶剂萃取的方法。常用的溶剂直乙醚、石油醚、氯仿一甲醇混合溶剂等。
其中乙醚溶解脂肪的能力强,应用最多。但它沸点低(34.6℃),易燃,可含有约 2%的水分,含水乙醚会同时抽出糖分等非脂类成分,所以实用时,必须采用无水乙醚做提取剂,并要求样品无水分。石油醚溶解脂肪的能力比乙醚弱些,但含水分比乙醚少,没有乙醚易燃,使用时允许样品含有微量水分。这两种溶剂只能直接提取游离的脂肪,对于结合态脂类,必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。因二者各有特点,故常常混合使用。具体提取这些结合脂类时,要根据各种食品不同情况作具体处理,并无固定不变的程式,因此,只能对基本原理和共同性的规律作简单介绍。一般说来,在提取之前,必须首先破坏脂类与其他非脂成分的结合,不然就无法得到满意的提取效果。
根据相似溶于相似的经验规律,非极性的脂肪要用非极性的脂肪溶剂.极性的脂肪则可用极性的醇类进行提取。有时,?结合脂类与溶剂之间也会发生混溶,这是由于分子之间的相互作用。例如,存在于卵黄中的卵磷脂,分子中的季胺碱使它呈碱性,它可溶解于弱酸性的乙醇等溶剂中,以钾盐形式存在于花生中的丝氨酸磷脂,其结构与卵磷脂有相似之处,但它是极性的、酸性较强的化合物,它不溶解于弱酸性的乙醇,而溶解于极性较弱的氯仿,它们之间所以能够混溶,这是由于氯仿很容易和酸性的极性化合物发生缔合现象的缘故。
有时,可以采用醇类使结合态的脂类与非脂成分分离,它或者可以直接作为提取剂,或者可以先破坏脂类与非脂成分的结合,然后,再用乙醚或石油醚等脂肪溶剂进行提取。常用的醇类有乙醇或正丁醇。以水饱和的正丁醇是一种谷类食品脂肪的有效提取剂,但它无法抽出其中的全部脂类,又由于正丁醇有令人不快的气味,以及驱除它所需的温度较高,这些缺点使它的应用范围受到了一定限制。
氯仿一甲醇是另一种有效的提取剂。它对于脂蛋白、蛋白质、磷脂的提取效率很高。适用范围很广。特别适用于鱼,肉、家禽等类食品。牛乳中的脂类在牛乳中并不呈溶解状态,而是以脂肪球呈乳浊液状态存在,它周围有层膜,使脂肪球得以在乳中保持乳浊液的稳定状态,这种膜是一群化合物,是以穿插配列的形式,吸附于脂肪球与乳浆的界面间的。其中:有蛋白质、磷脂等许多物质。
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