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| 亲和传感器探测到的选择性结合单元之间的偶联 | |||
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亲和传感器探测到的选择性结合单元（SBU）之间的偶联反应（例如，抗生物素蛋白，抗体，单链DNA，凝集素，和主机的人工分子识别物种）和与其互补的组件（例如，生物素，抗原，互补的单链DNA，糖序列和来宾目标化合物）。亲和传感器的设计，确保有约束力的SBU和补传感器表面上发生。因此，该传感器是隐式异构。换能器转换成可测量的响应绑定事件。
该传感器可分为两类：nonlabeled和标记。标注型的亲和力传感器直接检测亲和复杂，在形成复合物诱导的传感器通过测量物理变化。相反，标记的亲和传感器包括一个灵敏检测的标记物，和的亲和性配合物的存在下通过测量标签，然后确定。通常情况下，检测到的结合事件是不是一个直接测量。标签SBU或补充辅助信号绑定事件。酶标记物是特别有用的，用于提供信号放大。其成立得到更高的灵敏度。由于酶电极安培检测有效耦合氧化还原酶，是一个自然的过程耦合，酶标记的亲和反应，安培检测。
海涅曼率先使用碱性phosphataseantibody的共轭物进行夹心免疫10在这些实验中，使用氨基苯基磷酸酯（中取代硝基苯磷酸）作为底物，并用流动注射分析系统中被检测到阳极氨基苯酚产品泽设计主机的传感器采用了经典的Clark-O型2电极为基传感器和过氧化氢 ??酶作为酶标记11过氧化氢 ??酶用于分解H 2 O 2与O 2和H 2 O。当酶的标签固定在传感器表面上的亲和反应，增加O 2的信号中观察到的H 2 O 2溶液。rishpon鲍迪伦，和其他人已经开发出结合的酶标记物和在电极表面的固定化亲和成分的亲和力电极传感器1215虽然得到了优异的敏感性而受到阻碍，这些检测方法需要洗工作电极和更改孵化和测试解决方案。的主要问题是难以区分的酶催化反应从表面相关的反应溶液的体积。
亲和力传感器工程师的一个目标一直发展nonseparation方法是没有必要的洗涤步骤（源不重现）。段和麦耶霍夫在最近的一篇文章中，提出了一种方案，其中被带进细胞，从后面的电极基板，被转换成电活性产物，16这种方法使测量的结合反应，无需通常的洗涤步骤。然而，一个特别设计的细胞和电极是必要的。
有线酶亲和生物传感器在此之前，描述敏感? 2 ? 2建通过共价键固定化辣根过氧化物酶的氧化还原水凝胶中的电极1,2的氧化还原水凝胶形成HRP和水溶性聚（乙烯基吡啶）的季铵化的部分与2 -溴乙胺和部分与锇联吡啶氧化还原中心（PVP-NH 2 -输出端），和交联的聚（乙二醇二缩水甘油醚）玻璃碳上，对H 2 O 2的电催化减少图1中所示的序列，这些电极的灵敏度是非常高的：1厘米2 M 1。H 2 ? 2的电催化观察与少1微克/厘米2 HRP纳入水凝胶。通过添加微量的HRP的催化性能的水凝胶的改性导致的特异性结合的HRP标记的亲和试剂的电极可以选择性地检测和，将所得的安培的亲和力传感器将不需要洗涤或分离的情况的假设试剂。
这一假说的基础上，快速，紧凑，价格低廉，无分离安培为生物素抗生物素蛋白和抗生物素蛋白亲和传感器8的传感器，通过固定化一个SBU（抗生物素蛋白）到一个三维的电子进行氧化还原水凝胶（酶布线构造）3-mm的玻璃碳电极。本SBU SBU的互补成分（生物素）的电极亲和力。其互补成分的亲和传感器的温育导致补体从溶液中选择性吸收。如果补第一标记与氧化还原酶，温育导致以结合该内切酶在电极上的布线凝胶。示意性地在图2中，在这样的传感器的抗生物素蛋白-生物素系统的原理检测。
使用生物素/抗生物素蛋白亲和电极直接检测试验样品中（在图2中图示说明，路径A）氧化还原enzymelabeled补。这里的抗生物素蛋白被固定在水凝胶中的电极，和共轭的生物素标记的POD的氧化还原酶。在该方法中，亲和传感器含有氧化还原标记的补体（B-HRP）的溶液中温育。结合的补体选择性地固定在水凝胶中的氧化还原酶。此外，氧化还原酶的底物，生成上面的电极检测到的电信号。 图。直接转导的生物素化的辣根过氧化物酶（B-HRP），抗生物素蛋白（X），和生物素浓度（*）在PVI-输出端的“线”和抗生物素蛋白修饰电极的电流。当B-辣根过氧化物酶结合的抗生物素蛋白HRP-布线水凝胶（A）中，电流流过。电流被抑制，如果（B）的B-HRP结合到表面的抗生物素蛋白，而不是溶解，或（C）游离生物素的布线水凝胶中的抗生物素蛋白的结合位点被占用。
在POD的标签的情况下，上面的电极产生的电子中继过氧化物酶通过抗生物素蛋白过氧化物酶（POD）的选择性结合的水凝胶网络。在酶的底物H 2 O 2的存在下，电子被转移减少过氧化物酶（POD），过氧化氢 ??，生成的电流的流动。该电流是一个函数的浓度的生物素化过氧化物酶固定在电极上，由本SBU。如图3所示，电子从电极通过导线和过氧化物酶的H 2 O 2，这是electroreduced水中继。测量一般是在100毫伏（Ag / AgCl电极）。PVI-输出端是用聚乙烯基咪唑骨干和锇联吡啶氧化还原位点20％的咪唑基配位聚合物。PVI-OS提供了相同的氧化还原布线功能，PVP-OS-NH 2。
图。电流注入H 2 O 2后，协调锇联吡啶（PVI-输出端）电极（2微克抗生物素蛋白，3.3微克PVI输出端，和0.83微克的聚乙二醇二缩水甘油基醚[PEGDGE]）的抗生物素蛋白-改性的聚乙烯基咪唑的时间依赖100μM和1μg/ ml的浓度注射B-HRP。条件：5毫升PBS，1000 RPM; +0.1 V的Ag / AgCl。
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