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| 1,2 - 二氧杂环丁烷基板的化学发光检测 | |||
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可以进行各种碱性磷酸酯酶的反应底物的能力，以便能够提供高灵敏度地检测与许多的测定格式和仪器平台。：阮若佐荣，布鲁克斯拉里J. Kricka，科琳娜EM Olesen说，爱德华兹，约翰·C·Voyta酒店，伊雷娜布朗斯坦用碱性磷酸酯酶（AP）的酶标记物的1,2 - 二氧环乙烷的化学发光底物的使用提供了众多的免疫检测和核酸检测用格式的高灵敏度检测。目前的应用包括基于膜的蛋白质和核酸的检测，免疫测定，基于微孔板的核酸检测，越来越多的基于阵列的检测。
二氧环乙烷的四元环的环状过氧化物热稳定的1,2 -二氧环乙烷分子实际上是稳定的氧化反应中的中间体合成的可能性已被证明有牵连的短命的，不稳定的中间体，在氧化反应产生化学发光。。
金刚烷基-1,2 -二（氧杂环丁烷），碱性磷酸酯酶的直接底物的磷酸盐已被成功地用于的bioanalyte和内切酶检测。金刚烷基-1,2 -二氧环乙烷磷酸底物水解的去磷酸化，由AP导致形成亚稳的阴离子，该片段进一步以形成激发态的发射光（参见图1）的阴离子。二（氧杂环丁烷）的酚盐阴离子分解通过化学发起的电子交换发光（CIEEL）机制。2从苯酚中的电荷转移到的二氧杂环丁烷环促进的环状过氧化物裂解，释放出约100千卡化学激发所得到的羰基的片段的单电子状态。这激发物种在477 nm处发光，因为它恢复到基态。
图1。1,2 - 二氧环乙烷的AP底物的发光机制。
对AP-催化的二氧环乙烷分解反应获得的光发射是一个稳定的状态，从而可以使用几种不同的成像平台，用于信号检测的辉光。这些措施包括光电倍增管和光电二极管光度计，X光胶片，感光胶片，荧光屏，弱光敏感电荷耦合器件（CCD）技术的基础上使用相机和仪器仪表系统。
已被合成一个家庭的1,2 - 二氧环乙烷基片对AP提供特殊增强的性能特性（参见图2）。AMPPD，CSPD，CDP和的CDP明星基板销售Tropix（贝德福德，MA）在本文后面讨论。物Lumigen PPD，LUMI捷，捷光530，此外，捷光物Lumigen公司（密西根州Southfield），氧杂环丁烷纳入的AMPPD分子的配方，包括增强剂。此外，1,2 - 二氧杂环丁烷的其他水解酶，包括β-半乳糖苷酶和β-糖苷酶，底物都可用。
图2。一些1,2 - 二氧环乙烷的AP底物的化学结构。
大分子增强剂的加入显着提高了发光强度所产生的1,2 -二氧环乙烷，3,4在水溶液中的质子转移事件产生千分之一在有机溶剂中得到的化学发光强度。但是提高的水溶性季胺聚合物在水溶液中反应约100倍的光发射。其它聚合物的配方含有荧光素作为能量转移的受体，进一步提高光的产率和转移的最大发射波长为540 nm。的荧光胶束增强系统，是由十六烷基三甲基溴化铵和荧光能量转移的受体增加化学发光效率400倍。本文讨论了1,2 - 二氧环乙烷为基础的检测技术和能力的技术。
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