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| 兔单克隆抗体结合的单克隆抗体的最佳属性 | |||
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1995年,凯瑟琳骑士和她的同事在芝加哥罗耀拉大学开发出一种浆细胞瘤细胞系,称为240 e 1,从双转基因兔的癌基因过度表达v abl和发现。 240 e 1细胞融合与兔淋巴细胞分泌产生的hybridomas兔单克隆抗体。 8 然而,240年的稳定hybridomas e 1派生。令人担忧 由此产生的hybridomas没有基因稳定和抗体活动往往是多个通道细胞后丢失。 1996年,朱镕基和罗伯特Pytela维铭,那么大学的
加利福尼亚,旧金山,提出最大努力改善240 e 1和开发更好的融合伙伴细胞株,240年北高,效率和可靠稳定的融合杂种细胞。 一个数量的特征,区分240北从母公司240 e 1被观察到。 9 这个新的融合伙伴细胞株使得兔子杂交瘤细胞生产常规实验室技术,使大规模开发的兔子单克隆抗体成为现实。 类似于原始鼠标融合伙伴细胞株,240北细胞株继承了不良性状连锁的内源性免疫球蛋白g。 8 为了解决这个问题,维铭朱和他的同事们开发出了新的Epitomics衍生行240北,称为240 e w2,不携带一个内生重链基因和240 e w3,既缺乏内生重和轻链基因。 表我总结了特征不同的兔子融合伙伴细胞系。
兔子杂种细胞生成过程类似于鼠标hybridomas(图2)。到目前为止,与新的融合伙伴细胞株(240 e w2和240 e w3),成千上万的杂种细胞细胞株已经生成好了生命科学、诊断和治疗的应用程序。 其中,几千研究试剂和超过150,5免疫组织化学(IHC)产品已用于市场,和三个兔单克隆抗体(RabMAb)已被FDA批准作为二类、三类3,5产品。 Epitomics已经开发了一种人性化的RabMAb候选药物,这是证明有更好的体外和体内的功效比商业基准。 10 这种药物是目前临床试验的候选人。
高灵敏度和特异性。 通常,RabMAbs有10到100倍比鼠单克隆抗体亲和力。 我们最近为1000 Kd测量数据RabMAbs(没有显示)已经证实这。 相同或相似的抗原有时可能会发现在看似无关的分子。 因此,针对一个抗原抗体反应的可能
兔子杂种细胞生成过程。 B细胞被孤立在一只兔子,是免疫的免疫原,融合一只兔子融合伙伴细胞系生成hybridomas。 从hybridomas抗体筛选是使用各种化验。 选择杂种细胞克隆是subcloned确保他们是单克隆。 最后的克隆是短袜生产更大数量的rabMAbs在CELLine Integra瓶,或杂种细胞免疫球蛋白g基因克隆和重组抗体产生一个哺乳动物表达系统。
与一个不相关的抗原意外。 因此,特异性的抗体是极其重要的,以避免假阳性或信噪比问题诊断。 兔同更大的抗体和抗体筛查曲目严格,一个非常具体的RabMAb可以发展,已经在IHC诊断应用程序所有胰脏癌病人。 鼠单克隆抗体相比,相同的目标,RabMAbs检测与较高的敏感性和特异性,给清洁染色模式较低或没有背景在石蜡包埋组织。 11 此外,每个免疫兔脾包含高达50倍比一只老鼠脾脏淋巴细胞。 兔子淋巴结、骨髓、淋巴器官和其他也提供了许多来源的B细胞产生较大的杂种细胞池选择更高的亲和力和特定的杂交瘤细胞克隆。 有各种各样的技术来提高检测灵敏度的分析;然而,信噪比(特异性)通常不会提高。 我们相信一个更好质量的抗体是最好的解决方案来解决问题的双重敏感性和特异性。
抗原决定部位识别小说。 兔抗体识别抗原已被证明不被鼠抗体。 这种现象可能是由于降低了immunodominance在兔子,它允许识别低丰富蛋白质或抗原通常是不可见的老鼠的免疫系统。 9 它也表明,兔子有较高的成功率比小鼠抗体生成这些小的抗原,如蛋白质改性或解理网站,或构象抗原。 能力开发兔单克隆抗体抗原小说提供了一个新的机会,因为很多疾病immunodiagnostics目标在低丰度或形成复合物与其他蛋白质。 RabMAb雌激素受体(ER)、sp 1克隆,FDA批准的抗体为病理评估预后和治疗的乳腺癌,就是这样一个例子。 因为小说的表位被这个抗体的敏感性和特异性的病理评价都显著提高。 12 另一个例子是,RabMAb ERG、克隆EP110或EPR3864一致,这表明精致ERG蛋白表达和基因重组的存在在前列腺癌ERG因为能够识别一个罕见的表位。 13
容易识别的小分子或半抗原。 这是观察到兔子开发小分子抗体更容易比老鼠的nonpeptidic抗原决定部位呈现机制提供了一种解释前面描述的可能。
小分子如药物、类固醇激素,脂质或糖脂,食物或环境污染物与分子量小于1负责太小要适当处理和呈现给免疫系统。 因此,他们不是免疫原性。 然而,如果小分子化学与一个大的蛋白质分子,一个特定的抗体对小分子或化学组可以生成的。 研究表明,任何变更在形状、大小或电荷的半抗原的变化能够绑定到抗体,因此,必须要有一个大型多元化抗体结合综合nonpeptidic曲目表位把分子为基础开发高质量的抗体,这些半抗原。 显然,兔子免疫系统被开发来满足这一目的。 大量的表面抗原从致病微生物的碳水化合物,脂类,或糖脂。 看似,兔子拥有适当的免疫系统抗击这些微生物和能够产生高质量的抗体对试管的应用程序。
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