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实验室试管测试来检测感染西尼罗河病毒 | |||
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从最初的西尼罗河病毒疫情在纽约市,制造商已经开发出各种实验室试管测试来检测感染西尼罗河病毒。 大多数的这些测试是基于检测免疫球蛋白(即要么。 ,IgM,血液中免疫球蛋白g)或脊髓液,是因感染产生的,或病毒核酸片段在血液中通过使用核酸扩增技术。
其他西尼罗河病毒测试包括凝集抑制实验(嗨)测试和蚀斑减少中和试验(PRNT)。 嗨测试测量的最高稀释血清,抑制血凝试验(HI效价)的红细胞通过添加病毒特定的抗体在测试血清。 PRNT措施存在特定的中和抗体(IgM和免疫球蛋白g)在测试血清当他们被添加到日益增长的病毒文化。 这个测试是进行生物安全三级设施和用于确认推定ELISA结果的积极。 但这些测试的进行都是耗时的。
虽然用于筛选血液银行样本,核酸扩增试验(NAAT)方法不容易适用于临床诊断感染西尼罗河病毒。 虽然该方法具体检测急性感染病毒血症期间,少量的病毒核酸存在于血液可能没有在临床上重要或敏感的西尼罗河病毒在发展自疾病可能解决本身在许多情况下。 然而,输血的血液感染西尼罗河病毒在免疫功能低下的患者可能会产生严重后果。 西尼罗河病毒的方法检测NAAT收到间隙在美国和加拿大,是商业上可用来检测所有病毒的存在在日本脑炎serocomplex。
检测IgM的存在和免疫球蛋白g超过一定浓度阈值似乎是最有效的工具,西尼罗河病毒感染诊断。 通常,患者感染西尼罗河病毒检测出含有大量的西尼罗河病毒特定血清IgM的postinfection第八天,而西尼罗河病毒特定的血清免疫球蛋白g是由三个星期postinfection检测。 病毒本身通常不能被检测到当西尼罗河病毒特定血清IgM出现,虽然两个IgM和免疫球蛋白g可能保持超过一年。 基于这一事实,美国疾病控制与预防中心开发了一个免疫球蛋白M抗体捕获ELISA(mac ELISA)作为一个敏感的早期标志西尼罗河病毒感染和一个相应的免疫球蛋白g使用单克隆抗体的ELISA抗原捕获车辆。 3、4 许多公共卫生实验室采用这些测试来诊断西尼罗河病毒抗体在血液和脊髓液。
Panbio有限公司(澳大利亚昆士兰)开发的第一个商业间接荧光抗体试验,结果与CDC提供mac elisa通过使用西尼罗河病毒重组蛋白E抗原。 一个数量的IgM——和基于免疫球蛋白产生的ELISA检测也专注技术有限公司(柏树,CA),InBios国际有限公司(西雅图),并通过使用信封Panbio重组蛋白E或西尼罗河病毒灭活的净化作为抗原(NY 99应变)。 这些测试已通过FDA和健康加拿大,是商业上可用。
其他西尼罗河病毒测试包括ELISA格式结合使用一个纯化重组信封和非结构化的西尼罗河病毒作为抗原蛋白5提高特异性。 另一个试验是一种荧光微球免疫分析格式,夫妇一个rWNV-E聚苯乙烯微球,可以抗原提供了依据,同时测量多路微球免疫测定抗体活性重组抗原与几个黄。 5、6 研究描述了双微球免疫分析检测的反西尼罗河病毒和反圣。 路易脑炎病毒,这几个选择性抗体微球。 7
之前,所有的西尼罗河病毒测试呈阳性或免疫球蛋白g市场主要是基于elisa设备(如。 、专注技术的西尼罗河病毒捕获ELISA,Panbio IgM的西尼罗河病毒捕获ELISA IgM)。 这些检测是多步程序,要求仪表读取测试,需要后续计算得到索引值解释测试结果,并以6 - 10小时完成。 光谱诊断公司。(多伦多)最近发达RapidWN,快速检测试纸条基于格式IgM测定产生结果的西尼罗河病毒在不到30分钟,大体上是相当于不仅CDC mac elisa但也关注”和Panbio ELISAs IgM的捕捉。 RapidWN已通过FDA许可、加拿大卫生部。 与其他基于elisa设备,使用血清标本,RapidWN测试可以执行两血清和血浆样品。
在所有商业上可用IgM捕捉设备,因为他们不区分过去和当前的西尼罗河病毒感染,额外的免疫球蛋白g活动性也需要测试。 贪欲是通常估计基于能力的免疫球蛋白g来分离培养后的抗原与尿素溶液。 存在两个IgM和低热望在病人血清免疫球蛋白g表示最近的感染。 随着感染的进行,新生成的高亲和力抗体免疫球蛋白显示病毒抗原,免疫球蛋白g活动性增加。 高免疫球蛋白g的存在揭示了先前感染活动性。
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