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| 细胞捕获使用显微镜疟疾检测使用过滤样品制备 | |||
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疟疾是一种热带疾病,影响超过世界人口的40%。 根据2005年世界卫生组织的报告,疟疾威胁32亿人,与3.5亿年至5亿年情况下导致每年150万到270万人的死亡。 6 目前,主要方法检测疟疾是一个训练有素的操作者观察血涂片。 观察血涂片检查是一种特殊的活动,需要大量的操作培训。 使用血液涂片也迟钝:寄生虫浓度的20000年到30000年每毫升寄生虫(p /毫升)的全血需要准确的诊断。 7
一个多井板与一个双层的玻璃光纤红色细胞富集材料可以隔离红细胞从大量的人类DNA。 8 消除了人工DNA存在于白细胞结果的能力检测低浓度的寄生虫和聚合酶链反应(PCR),而不是使用PCR在整个人类的血液。 最低检出限为实时聚合酶链反应(rt - PCR)对全血是大约1000 p /毫升。 9 然而,通过去除dna含有细胞的敏感性增加到大约?rt - pcr是imately 20 p /毫升。
通过使用一个filterplate,红色细胞迅速寄生虫包含分离细胞含有人类DNA。 因此背景信号观察到明显低于传统PCR反应中观察到的信号对人体血液。 这样的低信号允许更多疾病的快速诊断与少的机会出现假阳性结果。 能够降低最低检测限度通过分离细胞PCR扩增前可以应用在其他方面比疟疾。 在任何应用程序中,靶细胞小于人类白细胞、净化目标细胞的兴趣应该是可能的。 随后的细胞裂解和PCR应该然后导致敏感性增强。
细胞捕获使用显微镜使用纤维媒体导致细胞被困在矩阵的媒体。 然而,如果细胞对内膜或恢复,一个深度过滤是无效的。 相反,一个真正的表面捕捉过滤器(例如。 ,该显微镜)是最好的方法,这样的目的。
该显微镜是薄聚合物电影圆柱孔穿过他们的深度(见 图2 )。 在显微镜的毛孔有既定的直径,是精确控制。 通常,孔隙大小分布对该显微镜是+ 0 / -20%来自声称的名义孔隙大小、孔隙大小可以用技术,如扫描电子显微镜(SEM)。 孔隙大小的引用是最大的粒子可以通过,这与铸膜(如。 、硝基、PVDF、尼龙、PES等)中,没有定义良好的孔隙(见 图2 )。
铸膜的结构类似于“开放的我们称之为泡沫(即。 ,液泡与支墙),紧固细胞网络一起长软管和连锁的肋骨,分散在三个维度”。 10 可以看出,“孔隙直径从而没有直接关系的大小的颗粒被过滤,因为毛孔实际上是裂隙形状而不是圆形。” 11
情况变得更复杂,因为所宣称的孔隙大小是基于测量的物理属性(如。 ,泡点)。 实际的尺寸的颗粒被过滤因此可以非常不同的孔隙大小的一个演员称膜。
几年来,能够专门隔离一个特定的细胞类型基于尺寸用于微生物学和癌症检测。 然而,这种能力扩展到隔离病毒颗粒从细胞的组件的全血可以有显著的影响,特别是在分子诊断。
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