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| 表征菌株在体外细胞培养传播或体内动物宿主 | |||
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连续稀释这些隔离在DMEM细胞培养基被发现在FTA卡。 6毫米,一夜之间被eluted拳在300 -?l DMEM培养基在4°C。 RNA提取自大约150?l洗出液的使用病毒RNA迷你工具包的试剂盒NV(Venlo、荷兰)。 特定的病毒RNA狂犬病病毒检测是通过一个嵌套的rt - pcr过程。
病毒灭活试验发现,干燥病毒到FTA卡2小时呈现病毒完全不活动,这是很重要的在田间采集标本时。 安全处理的标本为分子检测和他们作为biohazardous解密材料是关键因素。 灭活病毒促进海运样品回去给一个中央测试设施。
当产品的rt - pcr过程在琼脂糖凝胶分离、扩增片段给乐队的预期大小与冷冻病毒相比。 此外,测序的产品从一个病毒rt - pcr扩增在自贸区给大于99%的序列同源性,一个冷冻病毒,目前公认的金标准。
病毒RNA完全稳定在一个环境温度43天。 这样的稳定和简单的收集样品允许少量的biohazardous材料从活的动物是收集流行病学研究和确定疾病的传播途径。
最近的一个调查的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)用FTA卡来检测病毒水平全血使用简化的过程。 15 在这项研究中,一个活病毒被稀释在无菌生理盐水或全血来确定检测参数。 在实际测试中,仔猪血液样本检测PRRSV的存在。
该研究提出了一项协议的rt - pcr分析,在自由贸易协定在不提取PRRSV病毒DNA从自由贸易协定的磁盘。 该方法使用固定的RNA,通过治疗,自贸区矩阵酚醛的解决方案。 16 PCR抑制剂和细胞碎片被冲走,RNA仍然绑定到自贸区矩阵对原位合成第一链的互补。 一个整除的cDNA过一个rt - pcr检测PRRSV。 逆转录病毒RNA捕捉到的资料是相同的积极自由贸易区卡控制病毒RNA纯化的传统方式除了惯常的?。
在与他人合作的领域,Ambion Inc。(奥斯汀,得克萨斯州)用FTA卡捕捉西尼罗河病毒(西尼罗河病毒)从大脑tis?苏和口腔拭子从鸟类和检测牛瓶腹泻病毒(BVDV)在整个牛血。 这种病毒被捕获并稳定在FTA卡运输回中央兽医诊断实验室,提取病毒RNA从卡使用MagMax Ambion系统。
在基本的癌症和临床监测研究,检测疾病生物标志物是无价的确定目标药物发现和严重程度和阶段的癌症进展。 存在和水平的基因生物标记也可以与预后的疾病的过程。 例如,如果特定的生物标记物(如。 、循环DNA或细胞突变致癌基因)含活性可能与一个特定的疾病表型(如。 、开发的转移性癌症从局部肿瘤)、分子诊断测试可以帮助治疗决定一个特定的病人。
通过实验和人口研究的癌症患者与高转移潜能,这种相关性可能是发达,成为统计学意义。 这类研究可以识别子集的患者的治疗方案是咄咄逼人,不让他人不必要的接触化疗?治疗药物。
自由贸易协定已被应用在一些临床研究基因生物标记对肿瘤进展在黑色素瘤乳腺癌lympho?增生性疾病和上aerodigestive束癌症。 月17日至22日 在这些研究中,微型卫星作为生物标记物。 微卫星改变包括损失的杂合性(LOH)等位基因的失调,和突变。 在一项研究中,酒精中毒患者和健康志愿者为乙醇脱氢酶1基因分型c * 1(ADH1C * 1)等位基因来确定该基因的作用在肿瘤的形成。
此外,全血样品非常适合自由贸易区建立DNA纯化自完整细胞是最好的样本类型自由贸易协定的过程。 当接触到自由贸易区化学涂布矩阵、完整的细胞迅速溶化,DNA被困(身体,而化学)在纤维在矩阵。 蛋白质、核酸酶、微生物生物化学灭活的自由贸易协定,自由基陷阱保护DNA免受损害在室温下很长一段时间。 生物样品的收集在自由贸易协定提供了三个优势。 首先,归档的样品可以回顾新疾病生物标志物的研究开发。 第二,室温存储已节省空间的效率。 第三,样品可以在护理点收集和运送到一个中央分子诊断实验室通过邮件没有特殊处理要求。
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