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| 膜所起作用的分析必须考虑膜分析分为两大类 | |||
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在选择一个特定的免疫系统硝化纤维膜,膜所起作用的分析必须考虑。 膜分析分为两大类。 历史上,第一个这样的化验流过过滤分析(图2)。在这种类型的分析,定义了一个immunoreactant固定化到膜表面区域。 然后该膜覆盖在一个吸水层,作为储层通过设备泵样本容量。 固定后,膜上的蛋白质链接网站的其余部分被非特异性相互作用降到最低。 试验时使用,包含分析物的样本添加到膜通过矩阵和过滤器,使分析物结合固定化抗体。 在第二步中,标记的第二抗体(一个抗体酶共轭,耦合到一个彩色乳胶粒子,或抗体纳入彩色胶体)添加能够与捕获分析物完成三明治。 另外,二级抗体可以与样品混合,添加在一个单一的步骤。 如果存在分析物,彩色点发展膜的表面上。 这种类型的分析的优点是简单在制造和使用。
膜的选择这样一个分析取决于几个因素,如的敏感性分析,运行试验,所需的时间和读出的类型受雇于化验。 膜的孔隙大小的关键因素。 硝化纤维膜孔隙大小从0.2到8?m一直用于材料化验。 孔径越大,表面越低,因此,降低蛋白质链接能力。 但是因为毛孔大的膜支持更快速过滤率,他们可以产生更快的分析。 相反,smaller-pore膜可以创建一个更加敏感的测定。
标记抗体复杂的大小也决定了孔隙大小,必须大到足以允许未反应的抗体通过。 化验使用抗体耦合到一个彩色乳胶珠需要一个更大的孔隙大小。
最近,lateral-flow免疫系统已经发展到允许单步分析,只需要添加一个示例(图3)。在这些分析中,样品被添加到设备和流动的一端通过毛细管作用的间隙空间材料的设备。 同时继续沿着这流路径,示例联系人干试剂,通常标记的第二抗体,然后迁移与分析物的捕获带膜固定化抗体。 未反应的标记抗体继续流过去这捕获区,通常end-of-assay指示器。 一般来说,吸收剂材料末端的这些设备通过设备帮助绘制样品。
膜在这些类型的系统必须提供不同的性能比最好的使用主要材料设备。 毛细管率成为更重要的属性,因为它不仅规定运行试验所需的总时间也决定了住宅或反应时间在任何给定的区域。
要满足这些需求,硝化纤维膜与较大的孔隙大小,12?m,已经开发出来。 随着孔隙大小的增加,毛细作用或毛细上升的速度通过矩阵增加(图4)。然而,毛细作用速度和距离之间的关系不是线性的(图5),因此反应时间在任何时候沿着膜可能会有所不同。 即使有一个相当大的绑定能力下降large-pore-size硝化纤维膜,它保留足够的能力支持所有免疫测定(图6)。
孔隙大小并不是唯一的因素,会影响毛细管率。 大多数硝化纤维膜含有表面活性剂润湿援助,作为抗静电剂。 的数量和类型表面活性剂包括在膜可以改变赋予不同的毛细管率与等效膜孔隙大小(图7)。
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