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| 类似免疫荧光法的另一种免疫标记检测方法 | |||
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| 免疫酶标记技术是类似免疫荧光法的另一种免疫标记检测方法。它比免疫荧光法具有更多的优越性，不仅敏感、特异和重现性高，而且操作简便，不需要特殊设备，便于长期保存试验结果。因而成为一种很有发展前途的免疫学试验方法，其应用范围已日益广泛。 酶联免疫吸附测定(enzyme—linked immuno-sorbent assay，ELISA)，或称酶标记免疫吸附测定或酶连接免疫吸附测定，是固相吸附技术和免疫酶标记技术相结合的一种方法，也是目前免疫酶技术应用最为广泛的方法。酶联免疫吸附试验是用酶标记的抗体(或SpA)检测未知抗原或抗体的方法。此法敏感性高，特异性强。适合于ELIAA 检测的环境化合物必须是亲水性的、不挥发、在水中稳定的化合物，如磺酰基尿素、氨基甲酸酯、除莠剂及微生物的蛋白质产物等。 近年来ELISA试剂盒的商品化，为ELISA技术在环境检测领域的大量运用创造了条件，并使之有可能成为常规分析法。20世纪80年代中后期开始，国外已有运用酶联免疫吸附法快速检测粮食中污染霉菌的报道。和以往的微生物快速检测法相比较，酶联免疫吸附法有快速、灵敏、特异、操作简便、无需贵重的仪器设备等优点。 20世纪80年代初，Hammock和Mummas首先将免疫分析用于农药残留分析。农药免疫分析法不但具有与常规分析法相当或更高的灵敏度，而且无需使用昂贵的仪器设备，方法简便快速，在农药残留的快速筛选和定量检测以及现场和快速检测方面已显示出其独特的优点，受到环境监测工作者的重视。尽管免疫分析用于农药残留检测只有十多年时间，但发展很快。目前已建立了约50种农药及降解产物的免疫测定法。 由于免疫分析固有的优点，它在农药残留及其他环境污染物，如多联苯、二噁英、天然真菌毒素、抗生素、添加剂等的快速筛选和定量检测方面发挥着重要作用。这种新颖技术不再停留在研究阶段，其中部分技术已商品化，为在环境监测中应用创造了条件，并使之可能成为常规分析方法。 酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否，因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体，它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。目前，高质量的酶(如辣根过氧化物酶，简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上，宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。 |
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