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| 可溶性抗原与相应抗体直接反应不出现凝集现象 | |||
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| 可溶性抗原与相应抗体直接反应不出现凝集现象。将可溶性抗原包被在一种与免疫无关的颗粒状载体表面形成致敏颗粒，再与相应抗体反应，则出现凝集称间接凝集反应。常用的载体颗粒有人 O 型红细胞、绵羊红细胞、乳胶颗粒等。如载体颗粒是红细胞，称间接血凝试验；若为乳胶颗粒，则称为乳胶凝集试验。 将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上，然后与相应的抗体结合，也可出现颗粒载体的凝集现象，称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高，可用于微量抗体或抗原的检查。 间接血球凝集试验是根据红细胞表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出，使之吸附于红细胞表面，此时红细胞即称为“致敏红细胞”。这种致敏的红细胞具有细菌的抗原性，与相应的抗血清相遇可产生凝集现象。 间接血凝抗原的制备可用加碱或加热的方法使菌体中的多糖物质浸出，去除类脂，以免干扰红细胞的吸附作用。但如果是蛋白质时，则用来吸附的红细胞需 先用鞣酸予以处理。 方法如下。 ①O抗原的制备将每毫升100 亿的伤寒杆菌O菌悬液，置l00℃水浴中2h，离心沉淀吸取上清液，分装无菌试管，放4℃冰箱备用。 ②致敏红细胞悬液制备 取一定稀释度的抗原加等量2.5％绵羊红细胞悬液，混合后放37℃水浴箱中，每隔15min取出振摇一次，共经2h。然后取出，用生理盐水洗涤3次，而配制成0.5％悬液即成。 ③试验步骤 a.小试管9只标好号码于试管架上。 b．第l管加入0.9mL 生理盐水，其余各管各加入0.5mL 。 c．以吸管吸取已加热灭菌的免疫血清0.1mL加入第1管，混匀后吸取0.5mL注入第2管，同样第2管的血清与盐水混匀后吸取0.5mL注入第3管。如此依次稀释直至第8管。自第8管吸出O.5mL 弃去。第9管不加血清作对照。 d．于每管加入0.5mL已经致敏的0.5％绵羊红细胞悬液，混匀后放入37℃水浴中，2h后观察结果。凡最高血清稀释度的免疫血清试管中呈现完全血凝者，即为该血清的间接血清效价。 间接凝集反应具有敏感性高、快速、简便等优点，在临床上得到广泛的应用。如用乳胶凝集试验测定相关抗体，可用于辅助诊断钩体病、血吸虫病、类风湿性关节炎等。此外，用反相间接凝集试验测定抗原可做疾病早期诊断，如检测血清中的乙型肝炎表面抗原 (HBsAg) 及甲胎蛋白 (AFP) 等。 |
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