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链霉亲和素包被的磁性微球的结合能力重要因素 | |||
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链霉亲和素包被的磁性微球的结合能力的一个重要因素,对于大多数应用,具有最高的总的结合通常是最好的,其他变量起着重要的作用。结合能力测量,因为在给定的结合的标记物的微球中的每单位重量的重%的固体的悬浮液中,这些被提供获得他们真正的结合能力是很重要的。在设计的任何试验之前,我们建议百分比重量分析测量,以确保测量的%固体%固体与文??献报道的相一致。图5显示了差异,我们发现几家领先供应商提供的材料在我们的实验室。
图。涉及的变量在确定链霉亲和素包被的磁性微球的结合能力:(一)相对总结合和非特异性结合能力的微球从几个供应商的供应商报告的%固体(R),根据实验确定(重量)%的固体(EX);(二)添加和优化吖啶标签,以减少非特异性结合阻断剂的效果。
同样地,总的结合可以被分类的特异性和非特异性的约束力。前者是指通过链霉亲和素债券生物素配体连接,而后者是指连接的配体,通过其他一些机制的正常疏水性吸附在颗粒表面(见图5)。通过设计,使这两种类型的绑定可以测量的结合容量的测定,可以使用各种类型的阻断分子的优化,以减少非特异性结合。
链霉亲和素包被的磁性微球在免疫学和分子生物学领域,提供更传统的固相支持的几个优势。但是,使用这种类型的固体支持物的最大,重要的是要首先保证的结合能力,其特征在于最终的应用程序将最终使用的配位体的类型(大小和分子量)。果然,使得这种类型的固相支持物所涉及的技术,拥有先进的,所以用来描述他们的检测的灵敏性和简便性。由于免疫已从放射性酶促化学发光检测,结合容量检测紧随其后。
我们试图在这篇文章中的压力点,一旦做出选择的基础上的免疫链霉亲和素包被的磁性微球,重要的是要选择微正在开发的检测系统的基础上他们的表现。变量影响性能不仅是总的结合,但结合分子的空间位阻的特性相类似的分子,将被用于在实际的测定。如果这个信息是不是可以从制造商,这里描述的检测可以用于适当的表征。另外,在目前市场上的链霉亲和素包被的磁性微球的基础颗粒的特性变化很大。在开发这些绑定容量的检测,我们看了在颗粒从多家供应商,并作出比较,不仅基于总的结合,但如非特异性结合的特点,易于操作(如何迅速,他们可能被拉到一个标准的磁铁),测量与报告的固体%,依此类推。我们认为这些因素是至关重要的,以确保选择的试剂是真正的最好选择一个特定的应用程序。
参考文献
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