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室电化学电池的开发的化学氧化和碘化GFR标记 | |||
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室电化学电池的开发的化学氧化和碘化GFR标记的比色测定中的移动设备甲流图,示出了工作流的GFR标志物检测在血浆和尿液样品。方框图显示了两个平行的过程中,血浆和尿液分析的要求是略有不同的。当血浆或牛血清白蛋白(BSA)混合,用高氯酸,必须通过离心除去形成的沉淀物,而尿液分析需要4-8倍的过硫酸氢钾比血浆或BSA。否则,该过程是相同的。在BSA中的碘酞酸盐的吸光度值接近一半的碘化物,其对应于定量回收碘碘酞酸盐。
与不同浓度的碘离子和碘酞酸盐,4%BSA进行测试的结果示于图5。测量是在波长为390 nm,碘酞酸盐样品的吸光率值的那些碘化物的样品在相同浓度的值的一半左右。由于约一半(47%),泛影葡胺,碘酞酸盐的分子量为碘,这样的结果表明碘释放定量的碘酞酸盐的电化学过程。
检测碘化GFR标记血浆中的采用最优化的参数(参见图4)的测量在4%BSA浓度掺入人血浆样品中的碘酞酸盐,成功地检测到。各500μL的血浆样品,和4%的高氯酸中加入到离心管中,涡旋混合,并在15,000 rpm下离心一分钟,以分离沉淀的蛋白质。800微升的上层清液的等分试样溶液用移液管到的二室电化学电池的样品室中。白金线圈电极被放置到另一个室,分离的Nafion膜,填充有4%的高氯酸和pH 7.4的PBS缓冲液中的1:1混合物中。
清洁和铋电极放入样品室,样品溶液用磁力搅拌器搅拌。甲稳压电源的应用铋电极3.6 V到五分钟,之后的200微升等分试样的电解溶液通过装有0.5毫克的过硫酸氢钾制剂,然后通过PVP涂层膜的玻璃微纤维过滤器首先通过。碘酞酸盐的量存在于样品中的碘PVP配合物的吸光度测量。在图6中示出对于人血浆样品加标0,10,20,50,100 ppm的碘酞酸盐,基线校正的吸光度在390nm处。此浓度范围内的线性拟合表明,相关系数为0.981,0.026 ppm的截距。
尿液中检测碘化GFR标记用于检测人血浆中的碘酞酸盐标准曲线。显示的值是三次运行的平均值,该地块是取值范围为0-100 ppm的碘酞酸盐中的数据的线性拟合。
由于与等离子相比,可以忽略不计的尿液中的蛋白质浓度,尿液样本不需要离心。但是,尿液样品,加有碘酞酸盐未能开发优化的血浆样品的条件下进行测试时,任何颜色。这一结果产生的氧化剂(0.5毫克的过硫酸氢钾制剂中装入玻璃微纤维过滤器)被完全消耗的尿素本尿样中,造成不完全氧化释放出碘酞酸盐碘化物。的尿液样本中的碘酞酸盐浓度可以成功地测量玻璃过滤器上加载的氧化剂的量翻两番。
平均基线校正在390 nm处的吸光度,得到三组尿液样本中添加了0 - ,10 - ,20 - ,50 - ,和100 ppm的碘酞酸盐的值绘于图7。虽然此图是非线性的,在当前的发展阶段,高度的再现性(小误差棒)得到。因此,此图可用于准确地检测尿样中碘酞酸盐研究的浓度范围内。
结论
日益增长的经济和社会负担造成CKD GFR标志物在病人身边的情况下快速检测要求测试方法。一个简单的,廉价的设备,它使用一次性盒,Lynntech的电比色技术,使得它可以量化准确碘化GFR标志物在临床设置在血浆和尿液样本。使用这种方法,在血浆和尿液中的碘酞酸盐可以迅速而准确地确定在小于10分钟。
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