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桥接双抗原的免疫原性测定
      
  白质的治疗性使用药物,如重组蛋白,肽,抗体,结合受体,核酸,如DNA和RNA / RNA干扰已经在过去的二十年中增殖。这样大的分子已经建立需要确定,如果这种固有的免疫原性剂产生不良的宿主反应和副作用。
  如此大的分子疗法的开发人员已尽量减少其潜在的免疫原性,通过人性化的结构,伪装的免疫原性网站,或开发相结合的活性部位的的人类免疫原性序列的嵌合体结构。然而,尽管有这些措施,患者或患者的一个子集仍然可以发展免疫反应的药物,使其无效或潜在的生活threatening.3,4促甲状腺激素(TSH),使用HyperBind和其他商业板的ELISA试剂盒的比较。的HyperBind试验表现出较好的信号范围和灵敏度(点击图片放大)。
  大蛋白质或核酸acid?based的药物可以引起患者的抗体反应的程度是接纳及批准,这些新疗法的主要考虑因素。因此,需要大量的免疫原性研究,在药物开发过程中。
  检测抗药物抗体(ADA)的免疫原性检测在药物开发已成为一个必要的工具。已开发了许多免疫原性检测不等分子量从3?200kDa的治疗多肽和蛋白质使用HyperBind板。这种免疫原性检测血清学双抗原桥接免疫ADA形式桥两种药物分子配合物。作为一种药物分子捕获,并且被固定在微孔板。的其他药物分子作为检测器是共轭的信号产生部分,如酶。
  展示了一个例子为聚乙二醇(PEG)的聚合物,这是经常附着生物药物,以提高在体内的稳定性和分娩试验曲线生成的抗-PEG鼠标的免疫原性测定的剂量 - 反应曲线的单克隆IgM抗体稀释至所显示的水平。在该试验中的设计,用生物素标记的捕获药物分子被固定在链霉亲和素包被的HyperBind板。该探测器的药物分子与HRP标记的。
  其他应用程序在其成立以来,NIDS技术最初应用于横向流动检测。网络入侵检测系统的抗体结合物已被被涂覆在各种颗粒如金,乳胶,磁珠,以及其他各种商业颗粒。在大多数情况下,已经观察到改善灵敏度高达100倍。这样的改进是一个小样本列于表I
  NIDS技术的另外一个好处是其能力,以适应复横向流动检测。虽然许多复用侧流分析可用于检测药物的滥用,这些检测方法都使用竞争性测定的格式,需要限制试剂的量。例如,在夹心测定灵敏度实现与高浓度的捕获和检测抗体,复用的情况下是更具挑战性的,因为用于板上试剂的横流化验焊盘的能力是非常有限的。复用利用传统的方法是通过使用每个目标减标记的检测抗体,从而降低灵敏度Multiplex中的每个夹心法达到的,并产生显着的高剂量钩状效应(假阴性结果,在存在高浓度的目标分析物)。
  ANP技术结合了生物制剂和其他分析检测5-10复用和复用格式,保持每个assayís的灵敏度,但更重要的是避免钩在高浓度范围内的影响。处理与生物武器相关的可疑白色粉末事件的第一反应,这是一个重要的优势。要删除操作偏向于解释侧流试验,ANP已开发出紧凑型手持式阅读器,基于图像分析的测试线的强度测量灰度对比度带来正面或负面的答案,或定量的结果(见图7)。
  横向流的定量测定C-反应蛋白(CRP)是一种急性期产生的血浆蛋白,由肝脏和脂肪细胞作为非特异性感染性和非感染性炎症反应。甲宽范围的CRP测试用于检测非特异性炎症,以区分病毒和细菌感染。个人谁不患炎症或感染的基线CRP水平在这种无症状个体未来的动脉粥样硬化等心血管疾病的风险进行评估。最近的研究产生的临床数据支持CRP作为最好的心脏疾病预后的危险因素。对于心脏健康风险评估,高敏CRP(C反应蛋白)的检测是required.6,7
  侧流分析设计。 NIDS hsCRP水平快速测试是一个夹层侧流免疫CRP作为捕获和检测试剂使用鼠单克隆抗体。以上所喷涂的测试有效的控制线的山羊抗鼠抗体的检测线。的测试线,使之测量的NIDS医疗读卡器10分钟后,加入100μL的样品试片的强度成正比指尖全血CRP的浓度(参见图8)。该法是对国际标准CRM 470校准医疗用读取器使用的测试条带的特定特定的标准曲线,被上传至并存储在其存储器中。使用该标准曲线,定量的结果产生每个样品的测试根据测试线的强度。
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