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| 电化学用于凝血酶检测23在这些配置中 | |||
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许多不同的在电化学aptasensors已用于凝血酶检测23在这些配置中，凝血酶检测到使用的夹层格式。夹心法格式是仅适用于具有多个适配体结合区域的情况下的目标。凝血酶有两个的正电性exosites，这两者都能够结合特定的适配体。
夹心法进行固定金电极上的自组装单层硫醇化的适体。随后孵育电极与凝血酶。在第二次温育步骤，辣根过氧化物酶（HRP）标记的适配体被允许绑定到其他的凝血酶外部位。HRP标记的适配体，制备生物素标记的适配体与链霉亲和素-HRP孵育，有效地形成的过氧化物酶标记的适配体。的HRP，从而固定在电极表面上，使用过氧化氢 ??和扩散，锇的基于介体（输出端（联吡啶）2（吡咯-CH 2 -NH 2）] Cl）的电化学测定。在电极上测得的电流相关的凝血酶通过校准的数量（参见图3）。
适体的凝血酶适体相互作用的优化配置产生的电流为4.5μA。阴性对照验证该信号不是由于非特异性吸附。阴性对照，无凝血酶固定在电极表面上，导致在电流为1.8μA。第二个阴性对照，无底座的适体，产生一个相同的电流。第三个阴性对照，未经HRP标记的适配体，导致0.2μA的电流（参见图4）。
报道的电化学响应电流差在-0.1 V（对银和氯化银）之前和之后加入6 mM的过氧化氢和锇的氧化还原介体。担任过氧化氢的HRP的底物的标签，以及允许锇氧化还原介体的酶的转导成可测量的电流响应的营业额。
虽然这个实验中遭受显着的非特异性吸附的HRP标记的适配体，该系统的检测极限为92纳米（参见图5）。检出限为测量通过沿着线性回归直线的线性响应的的电流抗凝血酶值拟合。线的标准偏差的测定和乘以3的假没有检测的概率降低至5％。添加该值的信号的值是区别于噪声响应。
其结果是过氧化物酶标签，电化学检测显示出显着的背景响应（参见图4和图5）。过氧化物酶标签表现出强烈的非特异性吸附的电化学传感器。其他的电化学亲和传感器，使用过氧化物酶已观察到这种效应。过氧化物酶的电化学检测是非常敏感的，并没有得到充分的必要条件，以防止在过氧化物酶结合到电极表面。
结论牢固结合和具体的目标以外的明显的互补序列的寡核苷酸序列的能力允许基于寡核苷酸的检测策略将用于在新的领域，如治疗学，分离技术和生物传感器。适体的检测策略中的应用是特别有前途的。
适体提供有效身份证件和生产方法（例如，SELEX）??，简单的化学合成（例如，自动合成直接分析支持），固定在高密度，检测所有毒素的可能性，并在非生理条件下的稳定性。事实上，适体可能取代在生物传感器应用中??的抗体。然而，首先需要匹配的抗体库，适体生物传感器。其次，许多现成的开发，优化和解决这些实验的方法将需要创建适配子之前将很容易通过。
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