购买时请注意选择相应的产品名称
| 关键的评估对于充足率各种细胞表达系统今天仍 | |||
|---|---|---|---|
|
除了常规细胞表达系统之前使用,今天的技术提供有趣的选择通过瞬态哺乳动物细胞系统,能产生显著的更高的收益。 12 然而,这样的系统不受限制的适用性对于临床诊断应该被认真评估。 广泛的知识和经验获得了在过去的十年里已经导致了下面的结论就明智的和面向目标的应用在常规的重组autoantigens商业临床诊断可靠性。 Biotechnologically产生自身抗原目标提供可靠的替代本地抗原,有时甚至超过本国同行(即。 ,TPO),基于观测的越来越多的测试套件,使用它们。
独特性。 几个经常应用autoantigens只能产生recombinantly(如。 ,着丝粒蛋白B和A)。由于无法逾越的困难从自然资源中提取其他autoantigens,他们主要是甚至完全商业化作为重组蛋白(如。 、丙氨酰/ threonyl-tRNA synthetases(pl 12、pl 7],formiminotransferase cyclodeaminase(LC1],细胞色素P450 2 d6[LKM1],Ro / ss一个[52负责]蛋白质)。
很多很多的大型批量再现性。 高质量的重组自身抗原产品贡献有助于开发的细试管产品。 一个有价值的特性与复杂的重组抗原表达和纯化生产系统是大型批量一致性高很多很多(见图 1 和 2 )。
蛋白质的表达在杆状病毒感染昆虫细胞和纯化到至少90%的同质性。 抗原是点缀在硝化纤维带和孵化与主要血清和二级美联社抗体轭合物,其次通过开发和NBT / BCIP。 数据由r . l . Humbel教授,卢森堡。分析复杂的抗原。 一些自身抗原目标可以在性质和组成复杂不同的单一多肽。 为了区分血清学亚种、离散和理想情况下重组抗原目标域应检查。 图3 显示结果的分析基于个体重组抗原抗体U1-snRNP(68/70负责,和C多肽),线粒体M2抗原(完整的和个人的,BCOADC-E2多肽,OGDC-E2 pdc e2),核糖体组织磷酸化蛋白奠定基础(P0,P1,P2)。
的意义越来越重要的生物技术自身抗原的目标变得更加清晰当10年记录的临床相关的诊断抗原是与最近的一个概述autoantigens重组(见 表II )。 11 此表只列出了那些autoantigens是商用关键组件,因为他们满足下列要求:
非常高纯度(95%以上),可以通过六组氨酸融合蛋白。 这种高纯度使随后的温柔和高效固定化金属亲和层析纯化(见图 4 和 5 )。 13
证实了免疫/抗原功能。
高稳定性,它允许存储至少5年没有丧失免疫活动(见图 6 和 7 )。
足够高的收益率产生很多大小多达数几百毫克。
建立标准的生产流程。
没有疑问的适用性在所有试管试验技术,目前可用的(如。 、ELISA、线测定,immunodot,珠的基础技术,如磁或荧光染料标记的多路传输系统、蛋白质生物芯片/微阵列)。
净化的LC1。 杆状病毒感染昆虫细胞溶解产物(CL)是应用于镍加载螯合琼脂糖柱,水洗(W),并与缓冲区的eluted咪唑浓度的增加(Fr。1 Fr。 5)。标记是表示。 纯LC1 elutes作为64 -负责蛋白质纯度> 95%的有(Fr。4)。
因为多路复用系统和蛋白质生物芯片/微阵列是相对较新的和高度创新,他们值得进一步讨论其发展的当前状态。 因为稳步增长和新兴技术的可用性multianalyte的质量验证重组抗原必须不仅维持,但也增加了为了满足每一个需求在未来应用试管。 抗原应适合化学耦合使用几乎任何化学和能被发现在许多表面。
凝胶电泳和免疫印迹分析三个独立的很多(一)着丝粒蛋白B,(B)乔1和(c)增殖细胞核抗原。 蛋白质的分离在6 - 20%梯度凝胶和转移到PVDF膜。 探讨了膜与病人血清和发达与美联社共轭反人类的IgG抗体NBT / BCIP紧随其后。
大多数抗原的研究和发展Diarect管道已经被用于开发和生产数组或珠式多路化验自从他们的使用进行了探讨研究,分析自身抗原阵列自身抗体。 14、15 微阵列和越来越多路复用技术将经常珠基于基因组和蛋白质组学的方法补充发现自身免疫。 最近的研究提供了一个更大的理解中,这些新技术。
|
| 上一篇：考虑各种因素试管autoantigens当选择为他们的分析 | 下一篇：最近的自身抗原的发展检测到潜伏在更高的温度 |
|---|
无法在这个位置找到： xy/left.htm