购买时请注意选择相应的产品名称
| 细胞生产中进给速率对抗体的影响 | |||
|---|---|---|---|
|
对抗体生产中加料速度的影响在生物反应器系统检查。 上海生物反应器系统的效果进行了研究使用BR3530筒与METH7-4B6细胞株接种。
细胞的清除。 细胞清除的影响产生抗体和生物反应器运行长度决定在上海BR3530盒和PCP1.9D10细胞系。 哺乳动物细胞培养生长在hollow-fiber墨盒有一个有限的生命。 推测,积累细胞减少系统的生产力通过抑制整个hollow-fiber膜营养物质的运输,导致细胞死亡。 是否定期删除多余的细胞生物反应器筒ECS将延长运转周期和提高摇摇欲坠的运行参数,如粗糖和抗体生产调查。
收获方法。 抗体是收获的ECS定期墨盒是接种后两周内开始。 两种收获模式被使用,都使用相同的设备。 在连续模式下的收获,蠕动泵(Cole-Parmer,芝加哥)撤回了媒介的ECS缓慢,恒定速率(50 - 200毫升/天)。 同时同等体积的新鲜培养基被引入的ECS相同泵通过使用一个单独的块油管通过泵运行。 收获瓶定期改变,及其内容centrifuged g在1000 * 10分钟去除细胞和碎片。 包含抗体的上清当时的存储??20°C在测试之前。 第二个收获模式是一个批处理方法:固定体积的介质(50?250毫升)注入一次ECS,取代同等体积的antibody-rich室中。 这是每周两到三次重复。 收成被以同样的方式处理他们的连续模式。
结果
细胞生长和抗体生产。 铁道部9 b1细胞系和BR3530盒,这是决定在两个单独的运行,平均19天被要求生产第一个克抗体。 这个细胞株在两个实验Acucell 1100盒需要31天生产1克的抗体(表1)。
类似的实验进行VA1 18 d7细胞系。 的Clirans T220筒需要33天生产1 g的抗体,金额相当于10000兆瓦的另一盒(BR2010),这需要32天产生相同的金额。 但同样VA1 18 d7细胞系生长在BR3530(30000 mw)生物反应器筒只需要17天生产1 g的抗体。 同样,30000兆瓦生物反应器筒需要17天到达的目标电流的250毫克/人力资源,而所需的10000兆瓦的两个墨盒31日和30天,分别达到这一水平。
类似的结果——13和26天,分别获得了——与铁道部9 b1细胞株BR3530 Acucell 1100墨盒。 的平均时间10000 mw -孔隙大小筒需要达到目标水平(1 g抗体生产)是32天。 这与平均为30000 mw盒16天。 同样,所需的平均时间10000 mw -孔隙大小筒达到250毫克/人力资源的目标电流的28天与18 BR3530盒。
抗体生产效率。 我们比较了每个hollow-fiber墨盒产生抗体的能力作为intracapillary介质消耗的数量的函数由系统在实验。 这些值被表示为毫克每升中等消费产生的抗体在整个运行。
使用铁道部9 b1细胞系,我们确定最优生产效率50 mg / L的BR3530墨盒和24 mg / L Acucell 1100盒。 VA1 18 d7细胞株生长在10000 mw墨盒有35毫克/升的生产效率Clirans T220 BR2010墨盒和30毫克/升。 然而,当相同的细胞系是生长在BR3530墨盒(30000 mw),效率增加到44 mg / L的介质消耗。
比较的抗体生产BR3530 hollow-fiber筒,在72小时的静态组织培养(表1)揭示了一个相关性的抗体的细胞株产生72小时文化和数量在30000 mw生产墨盒。
进给速率。 进给速率对抗体生产的影响在两个实验测量使用METH7-4B6-8C3.2.1细胞株生长在BR3530盒。 在第一个实验中,intracapillary饲料率慢慢从0.5升/天增加到最多只有3.5 L /天(图1)。在第二个实验中,intracapillary饲料率增加更快从1 L /一天最多5.0升/天。 进给速率较低的运行产生抗体用更少的时间比送更高的运行速度(图2)。在40天,生产效率的low-feed-rate实验118 mg / L和high-feed-rate方案的生产效率是58毫克/ L(表1)。
抗体生产饲料率的影响以另外两个实验用铁道部9 b1 F11 P1.1.1细胞株生长1100年Acucell墨盒使用Acusyst jr .)生物反应器系统。 进给速率开始的时候1 L /天,迅速加速到8.4升/天,运行的效率增加了只有9 mg / L(图3和4)。进给速率较低的策略从0.6升/天,慢慢加速3.3升/天,生产效率几乎增加了两倍至24 mg / L(表1)。总抗体生产从每个运行大约是相同的。
细胞的清除。 当PCP1。 9 d10细胞株生长在上海生物反应器系统使用BR3530盒,只有25天后细胞达到融合。 然后抗体生产开始急剧下降(图5)。30天开始,细胞从盒中取出每周两次将注射器充满IMDM(没有的边后卫)extracapillary港口和大力推动和拉动注射器的柱塞。 大量的细胞,细胞碎片和大量的抗体得到这个过程。
每个九cell-removal程序执行后立即在实验这一个生物反应器,抗体产量显著增加。 粗糖也有相应的高程。 (图5)。
批处理和连续的收成。 的收获模式是如何影响总抗体生产? 收获的批处理模式使用注射器或更快的泵的速度清除抗体。 当VA1 18 d7细胞株生长在上海系统切换从连续到批处理方式收获,抗体的浓度从平均增加413到3387?g /毫升(图6)。
|
| 上一篇：影响中空纤维生物反应器抗体生产效率的因素 | 下一篇：劳动的生物反应器系统低效率产生的抗体 |
|---|
无法在这个位置找到： xy/left.htm