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| 在免疫测定中使用微多孔性聚合物膜的 | |||
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微孔膜已被证明是非常成功的表面为简单，快速免疫给药系统的开发。由硝酸纤维素膜为目前首选的材料，就可以生产出多种孔径和表面活性剂处理，以优化其性能。这些膜有助于建立灵敏，稳定，重现性试验。 S因斯在1979年首次证明了蛋白质可被转移到硝酸纤维素微孔膜和使用抗体检测，1开发中使用这些高表面积材料的快速免疫检测已激增。27初步调查多集中于理解为阻止对膜的非特异性相互作用，蛋白质和聚合物和需求之间的互动和发展了一系列的检测方法和策略。这项工作已经导致了各种免疫递送系统用于检测分析物的大菜单。膜被用在两个三明治和竞争性免疫检测小型和大型分子。对照品
键膜特性包括聚合物类型，孔隙度，表面活性剂含量和强度。因为性能和基于膜的免疫系统的能力是由薄膜的特定性质的影响，这些因素进行全面表征和理解是必不可少的。
膜的类型用于免疫测定递送系统的膜的选择在很大程度上依赖于三个属性：蛋白结合能力，孔隙度和强度。膜的固定化大分子的能力，尤其是蛋白质，是极为重要的，因为它们是在测定中使用的固相。该膜的孔隙率是重要的，因为反应物必须流经矩阵，以便它可以单独结合的从游离的组件。膜的强度是对于设备的制造和最终用途重要的。
聚合物测试其结合蛋白的能力，包括纤维素（硝化纤维素，乙酸纤维素，再生纤维素），尼龙和聚偏二氟乙烯（PVDF），如图1。醋酸纤维素和再生纤维素的结合能力是不够的大多数免疫测定，但是一系列的高容量可与硝酸纤维素，尼龙和聚偏氟乙烯膜。（数字尚未公布上线。）
目前大多数基于膜的免疫使用尼龙或硝化纤维素。这两种蛋白质结合非共价，虽然相互作用的机制可能是不同的。一种聚酰胺，尼龙通过静电和电荷相互作用结合的蛋白质，而硝化纤维素与蛋白质的相互作用似乎是主要疏水性的。10两种聚合物结合大多数蛋白质-特别是，抗体-以足够的密度和亲合力来支持的免疫测定。它们一般不要求固定化反应物的共价连接。
虽然尼龙也许是在商业免疫测定递送系统中使用的第一种聚合物膜，11硝酸纤维素已被证明是更通用的，并且是当前所选择的膜。而硝化纤维素的蛋白结合能力比尼龙低，它足以支持灵敏的免疫测定。这使得硝化纤维素为基础的检测，以避免可能在尼龙为基础的检测有助于背景非特异性相互作用的高层次。硝化纤维可以在很宽范围内的孔隙率来制造，从0.05至约12微米，提供了又一个广泛的结合能力和芯吸或毛细管上升速率通过该测定中的反应物的流动，以帮助。
流通和横流免疫中选择一个特定的硝酸纤维素膜用于免疫测定系统，该膜起着在测定中的作用必须加以考虑。基于膜的检测分为两大类。在历史上，第一个这样的测定法是流过过滤测定（图2）。在制作这种类型的测定法，免疫反应物1被固定到规定的区域上的膜的表面。该膜然后被叠加在充当储通过该装置泵送的样品体积的吸收层。以下固定化的蛋白结合位点在膜其余部分被阻断，以减少非特异性相互作用。当测定时，含有分析物的样品加入到通过基质膜和过滤器，使分析物结合到固定化的抗体。在第二步骤中，一个标记的第二抗体（酶结合物，其耦合到一个有色乳胶粒子的抗体，或掺入着色胶体的抗体）被添加，与捕获的分析物以完成夹心反应。或者，第二抗体可以与样品混合并在一个单一的步骤中加入。如果分析物存在，着色斑点开发了膜的表面上。这种类型的测定的同时具有在制造和使用中简单的优点。
用于这种测定的膜的选择取决于几个因素，如测定的灵敏度，以执行测定所需的时间，并读出在测定中采用的类型。膜的孔径大小是关键因素。以从0.2到8微米孔径硝酸纤维素膜已被用于流过测定。较大的孔隙尺寸，较低的表面积，因此，较低的蛋白结合能力。但由于膜具有较大的孔隙支持更快速的过滤速度，它们能产生更快的检测。相反，较小的孔径的膜可以创建一个更敏感的检测。将标记的抗体的复合物的大小，也可以规定的细孔径，其必须足够大以允许未反应的抗体通过。使用耦合到一个带颜色的胶乳珠的抗体测定法需要较大的孔隙尺寸。
最近，侧流免疫测定系统已被开发，以允许单步检测仅需要增加一个样品（图3）。在这些测定中，样品被加入到该装置的一端，并通过材料的设备中的空隙空间流动通过毛细管作用。而沿着该流动路径继续，样品接触干燥的试剂，通常标记的二抗，然后迁移与分析物与固定的抗体对膜的捕获区。未反应的标记抗体持续流过此捕集区，通常以结束检测的指标。通常，在这些设备的远端的吸收材料，可以通过该设备抽取样本。
在这些类型的系统的膜，必须提供不同的性能比流过器件的最佳使用。毛细管速率变得更加重要属性，因为它不仅决定了运行试验所需的总时间也决定在任何给定区域中的停留或反应时间。
为了适应这些要求，具有较大的孔径硝酸纤维素膜，高达12微米，得到了发展。随着孔径的增加，芯吸或毛细管（图4）的上升穿过基质的增加的速度。然而，芯吸速率和距离之间的关系不是线性的（图5），因此反应时间在沿膜的任何点可以变化。即使是在一个大孔径的硝酸纤维素膜的结合能力大幅度下降，其保留足够的容量来支持所有免疫测定（图6）。
孔径是不能够影响毛细管率的唯一因素。最硝酸纤维素膜含有表面活性剂，以帮助润湿和作为抗静电剂。将包含在膜的表面活性剂的量和类型可以改变，以赋予不同的毛细管率膜用等效孔隙尺寸（图7）。
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