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| 开发一种生物荧光检测HIV病毒载量监测 | |||
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以下三种通用的方法是目前在发展中国家来检测和量化HIVRNA的可供选择：反转录聚合酶链反应（RT-PCR），核酸序列的扩增（NASBA），和支链DNA（的bDNA）。每一种方法需要三个步骤：样品制备和病毒核酸的提取，从检测对象的病毒RNA，并检测和/或扩增产物定量所产生的靶核酸序列或信号放大6RT-PCR使用反向转录酶转化病毒RNA到互补DNA（cDNA），然后复制，因此可以被检测到。在该方法中，RT-PCR定量HIVRNA，使测定病毒负荷。6是NASBA扩增的等温方法，其中，靶RNA是由3-酶系统放大，并通过竞争性共扩增的控制量化。这种方法消除了对所使用用于RT-PCR的热稳定酶和热循环仪器。-PCR），核酸序列扩增（NASBA）和支链DNA（的bDNA）。对照品
RT-PCR使用逆转录酶酶病毒的RNA转化为互补DNA（互补），然后复制，因此可以被检测到在这种方法中，RT-PCR量化艾滋病毒的RNA，使病毒载量的决心,目前，以下四个市售的病毒载量检测所有使用这些通用的方法之一：科瓦斯AmpliPrep和科瓦斯的TaqManV2.0由罗氏分子系统，实时HIV-1由Abbott实验室，Versant的HIV-1RNA1.0试验（KPCR）由西门子医疗诊断和的NucliSENSEasyQHIV-1v2.0顺次生物梅里埃公司。4,6科瓦斯的TaqManHIV-1的COBASTaqMan探针的HIV-1检测是一种体外核酸目前，以下四个商用病毒载量分析所有一般使用其中的一个方法：科瓦斯AmpliPrep和科瓦斯的TaqMan2.0罗氏分子系统，实时的HIV-1由雅培公司，熟练的HIV-1RNA的1.0测定（KPCR）西门子医疗诊断，和的NucliSENSEasyQHIV-1V2.0梅里埃。
扩增检测为HIV-1RNA在人类血浆中使用的COBASAmpliPrep仪自动试样处理和自动化的扩增和检测的COBASTaqMan探针分析仪或科瓦斯的TaqMan48分析仪定量。这是一个完全自动化的，实时PCR系统为目标的HIV基因组，从而导致检测的下限双方的插科打诨和LTR地区。6的COBASTaqMan探针HIV-1的检测只需要一定的技术技能，具有较宽的动态范围，是完全自动化（包括样品转移），并且只需要分析一个单间，但它也有一些缺点。为了进行的COBASTaqMan探针的HIV-1检测，一些专用的实验室空间和设备是必需的，适度的技术支持是必不可少的。该设备也是昂贵的，通常是超出了任何发展中世界的设施，可提供空间和支持的范围。6实时HIV-1。雅培实时HIV-1检测采用实时荧光定量PCR，但不像TaqMan探针，它的目标是在POLHIV基因组的整合区域。HIVRNA定量是使用m2000sp样品制备和核酸的提取，并m2000rt用于扩增和检测的自动化流程。6雅培实时检测的主要优势包括其高吞吐量，大动态范围，而事实上，它可以是完全自动化的，封闭的系统中的PCR。此外，该设备可用于评估HIV之外的其他病原体。然而，与的COBASTaqMan探针，该系统需要专用的设备和空间，良好的技术支持，并有相当的资金投入。6Versant的HIV-1RNA的1.0。的Versant的HIV-1RNA1.0试验（的bDNA）是一种自动检测该还针对HIV基因组的聚合酶整合区域，使用样品准备模块和扩增/检测模块一次。6的Versant的测定法也具有高吞吐量和可以完全自动化，从而降低污染的风险较放大试验定量的HIV-1RNA在人类血浆使用科瓦斯AmpliPrep仪器自动标本处理和科瓦斯的TaqMan分析仪或科瓦斯的TaqMan48分析仪自动放大和检测。
目前的商用实时HIV病毒载量测定的表一，主要特点。（点击图片放大。）表一，当前商业实时HIV病毒载量的主要特征分析。（点击图片可放大）。PCR反应。没有特殊的实验室设置，或单独提取区域是需要的，并且该设备还可以用于评估其他病原体。然而，Versant的检测的主要缺点包括需要熟练的技术人员，良好的技术支持和财政资源。6的NucliSENSEasyQ。的的NucliSENSEasyQHIV-1的2.0版使用NASBA为目标的gag区扩增艾滋病毒和定量核糖核酸（见表I）。该测定游NASBA与实时检测通过使用利用的NucliSENSEasyQ分析仪分子信标。9的的NucliSENSEasyQ分析提供高吞吐量的优势与需要的唯一介质技能。它也是一个完全自动化的，封闭的系统。但是，它需要专门的空间和设备，并且有污染的高容量的实验室危险。技术支持是必需的，增加了与此相关的试验已经很高的成本.
NucliSENSEasyQ分析提供高吞吐量的优势只有中等技能要求。这也是一个完全自动化的，封闭的系统，然而，它需要专用的空间和设备，有一个大容量实验室的污染风险。技术支持是必需的，已经增加了高成本相关的分析。6
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