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| 酶活性的生物素含量：碱性磷酸酶 | |||
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涉及放射性标记的监管问题已经越来越普遍，兴趣增加在使用其他的检测手段结合容量检测。检测开发中的一个主要焦点一直使用酶标记。虽然几种酶可以用作标记，一个最常见的，因为其广泛的商业可用的，是碱性磷酸酶。这种类型的结合测定的普及的原因包括它的简单性，与底物的酶反应所给出的强信号，而事实上，碱性磷酸酶镜与许多常用连接的配位体，如免疫球蛋白分子的大小和重量的。通过每个恒定浓度的底物的酶不同浓度的吸光度的标准曲线的基础上发展，所产生精确定量的装订可以简单地通过使用分光光度计的比色检测。
对于链霉亲和素包被的磁性微球，该检测方法包括第一系列稀释的生物素标记的碱性磷酸酶（B-ALP）和反应，这些与底物浓度恒定，在这种情况下，对硝基苯磷酸（PNPP）。本文有对照品网收集整理提供用底物的浓度将决定反应动力学，所以找到一个合适的浓度，此外，为准确的分光光度法测量，允许有足够的时间后，将需要一些优化。一旦已经确定，这个浓度的连续稀释的B-ALP反应，与基片，并在405nm处的吸光率读数是用来生成标准曲线的。确定为B-ALP的适当稀释液，使得它们将下降的线性范围内，用于在分光光度计上测量吸光度。
一旦这些变量进行了优化，最后一个变量要考虑的是在实际的测定中使用的微球的浓度。由于B-碱性磷酸酶（ALP）共轭微球浓度的增加，因此没有信号发出了由ALP-PNPP相互作用的量。因此，微球的浓度，必须建立这样的信号是由标准曲线确定的限制范围内。
用这个方法的一个重要的预防措施是允许的时间用于的基板开发（颜色形成）。碱性磷酸酶（ALP）使之反应与PNPP，颜色上继续形成，直到所有在衬底已经耗尽，给潜在的虚假高读数。因此，如果选择的速率依赖格式，进行显色反应的时间必须被精确地控制。相反，如果是将要采取的端部点的读数，碱性磷酸酶（ALP）共轭性微球的相对浓度必须被控制，例如，使反应完成，仍然会发出的限制范围内的标准曲线的吸光度读数。对照品网网站网站：www.gjbzwz.com
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