购买时请注意选择相应的产品名称
| 开发新技术执行矩阵绑定和直接测量的总血红蛋 | |||
|---|---|---|---|
|
糖化血红蛋白(HbA1c)是唯一适合糖尿病的诊断和监测其治疗与一个特定的数字每年测试(通常是按季度)。 最近的项目由联合国、世界卫生组织、国际糖尿病联合会(IDF)已经解决全球糖尿病的流行和需要更好的诊断和治疗。 在2010年国家Glycohemoglobin标准化程序(NGSP)制造商的论坛的主席IDF问制造商的商业糖化血红蛋白测定系统考虑如何提供准确、可靠的糖化血红蛋白化验到不发达国家,没有资源来让目前销售测试可用。
一些电流百分数(% HbA1c)糖化血红蛋白测定方法包括离子交换或亲和柱色谱的基础测试,这是昂贵的和不是移动。 其他方法结合免疫测定(需要冷藏)和/或相对昂贵的墨盒和米。 一个技术已经被开发出来,使得设计的低成本系统,满足需求为糖尿病测试在发展中国家。
这种科技的核心(描述在美国专利7195923和7695973)是一个分离矩阵,用化学方式修改为包含两个带负电荷的团体和boronate团体。 当pH缓冲流经矩阵是酸性的,带正电荷的糖化血红蛋白结合,非糖化带负电荷的团体。 当pH值是基本,血红蛋白失去电荷和离子释放绑定。 在基本的pH值,boronate绑定不仅顺式二醇还持有的葡萄糖糖化血红蛋白糖化血红蛋白在矩阵。 血红蛋白绑定在矩阵每个条件下通过反射率测量是量化膜的使用系统的血糖计类型表。 膜可以被纳入简单的条,可以存储不制冷。 系统利用这项技术允许更广泛的诊断和监测的糖尿病在发展中国家和发达国家。
分离矩阵准备
基膜用于分离矩阵是一个亲水、渗透膜与孔隙大小足够大以允许红细胞进入。 Sartobind膜都由Sartorious和横向弗洛膜通过Porex集团(费尔,GA)可以用作基膜。 运动的样品和缓冲通过膜可以是横向或纵向。
下面描述的工作使用膜在横向流配置。 膜厚度影响测量灵敏度,厚膜能够绑定更多的血红蛋白。 一个10密耳厚膜没有足够的血红蛋白结合,提供一个合适的信号在原型试验系统。 一个厚度至少15毫升是需要提供足够的约束力和信号。 因为反射率测量了膜,膜表面应相对均匀,减少脱到带钢的变化结果。 两个膜进行测试包含共价链接羧酸团体,这些函数作为带负电荷的团体在技术。
Boronate组添加到膜通过共价结合m aminophenylboronate(APB)羧基团体已经在膜用碳化二亚胺1乙基3(3-dimethylaminopropyl)碳化二亚胺(EDC)。 随着反应时间 的发展,更多的boronate组添加到羧基基团膜。 羧基团体的数量降低,而总血红蛋白绑定减少。 boronate团体的数量增加,糖化血红蛋白bindingreaches一个高原。 反应时间的控制,以获得最佳的糖化绑定没有显著损失总绑定。
检测是开始添加第一个缓冲区(pH值6.5)和借鉴反射率测量。 100%的反射率为每条设置为测量反射率的参考材料。 的反射率的膜后,立即带插入到计是逻辑参考使用。 然而,测定精度的应用改善了膜的反射率与缓冲流经它作为参考。 在一项实验中,测定精度的正常样本5.5%如果参考是膜孤独。 精度是2.9%当参考是膜与缓冲流经它。
血液样本被添加和冲洗通过膜作为缓冲继续流。 这个缓冲区还包含一个洗涤剂,hemolyzes红血细胞释放血红蛋白。 在pH值为6.5,非糖化和糖化血红蛋白带正电和绑定ionically带负电荷的团体在矩阵。 这个绑定时发生迅速和血红蛋白穿过矩阵。 在pH值为6.5,boronate团体都在一个配置,不支持绑定的糖化血红蛋白,因此束缚血红蛋白将包含相同比例的糖化血红蛋白作为示例。 足够数量的缓冲区添加删除非绑定(超额)血红蛋白从矩阵。 血红蛋白的量绑定到矩阵用于测量总血红蛋白使用反射率测量。 光源是一个领导在一个名义上的430 nm波长,使用415 nm吸收峰的血红蛋白的定量。
在第一次测量,缓冲在pH值为9.5添加和冲洗通过膜。 的电荷血红蛋白变化,和离子绑定是逆转。 这个boronate组改变配置,支持绑定的糖化血红蛋白作为它被释放从带负电荷的团体。 绑定到boronate团体是快速和发生的血红蛋白是移动通过矩阵。 结果数量的血红蛋白,被绑定到矩阵来
糖化血红蛋白使用反射率测量。 两个绑定步骤快速和允许矩阵是适应要么流通型或横向流方法。
图1显示了改变反射率(% R相对于干带反射)作为一个分析的进展。 当第一个缓冲区添加(1)、反射率下降,因为矩阵变得更加透明。 血后添加(2),其反射率下降——因为前面的高浓度的血红蛋白穿过矩阵,吸收光线。 作为非绑定血红蛋白冲洗通过矩阵(3)、反射率增大到一个高原,由于ionically绑定血红蛋白中剩余矩阵和一个反射率测量(一个)。 当第二个缓冲区添加(4),反射最初滴,然后增加作为非糖化血红蛋白前冲洗通过矩阵(5),反射率增大到某一高原由于糖化血红蛋白中剩余矩阵,和第二反射测量(B)。 这两个反射测量(A和B)用于计算总和糖化血红蛋白浓度。 糖化血红蛋白的比例占总血红蛋白是用来计算在样本的% HbA1c如下所述。5 1
|
| 上一篇：PCT生物标志物检测是否存在细菌感染处于初期阶 | 下一篇：膜厚度和血红蛋白结合位点的数量影响最小样本 |
|---|
无法在这个位置找到： xy/left.htm